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邻硝基苯-β-D-半乳糖苷

邻硝基苯-β-D-半乳糖苷用途

【用途一】
用于检测β-半乳糖苷酶(β-galactosidase)活性，是β-半乳糖苷酶的显色底物。经β-半乳糖苷酶催化后可产生黄色产物，在410－420nm波长可以检测吸光度。

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邻硝基苯-β-D-半乳糖苷名称

[ CAS 号 ]:
369-07-3

[ 中文名 ]:
2-硝基苯-beta-D-半乳糖苷

[ 英文名 ]:
ONPG

[中文别名 ]:

[英文别名 ]:

EINECS 206-716-1
2-Nitrophenyl β-D-galactopyranoside
T6OTJ BOR BNW& CQ DQ EQ F1Q &&β-D-Galacto Form
MFCD00063255
2-Nitrophenyl β-D-Galactopyranoside [Substrate
o-Nitrophenyl β-D-galactopyranoside
β-D-Galactopyranoside, 2-nitrophenyl
2-Nitrophenyl β-D-galactoside
2-Nitrophenyl beta-D-Galactopyranoside
2-Nitrophenyl β-D-galactopyranoside (ONPG)

邻硝基苯-β-D-半乳糖苷生物活性

[ 描述 ]:

ONPG 是一种比色和分光光度计底物,用于检测 β-半乳糖苷酶活性。

[ 相关类别 ]:

信号通路 >> 其他 >> 其他

生化试剂

研究领域 >> 其他

[体外研究]

该酶对ONPG具有高水解能力(100％),对其天然底物乳糖具有中等活性(25.7％)。然而,酶对所有其他生色硝基苯类似物的水解能力非常弱,表明Gal308是具有窄底物特异性的β-半乳糖苷酶。为了研究重组酶的动力学参数,测定了GalP8对ONPG和乳糖的Michaelis-Menten常数(Km),转换数(kcat)和催化效率(kcat/Km)。 ONPG的kcat和Km值分别为464.7±7.8s-1和2.7±0.3mM,乳糖分别为264.2±2.1s-1和7.1±0.8mM。 ONPG(172.1 s-1mM-1)酶的kcat/Km值比乳糖(37.2 s-1mM-1)高4.6倍,这清楚地表明Gal308对ONPG的催化效率要高得多而不是乳糖[1]。

[激酶实验]

在该研究中使用包括ONPG和乳糖的两种底物测量β-半乳糖苷酶活性。通过遵循从ONPG释放的邻硝基苯酚的量来测量ONPG的β-半乳糖苷酶活性。反应混合物由100μL酶溶液和400μLONPG溶液（2.5g / L，在pH6.8的100mM Tris-HCl缓冲液中）组成。在78℃温育15分钟后，通过加入等体积的1M Na 2 CO 3终止反应。通过在A405测量来定量测定释放的邻硝基苯酚。一个活性单位定义为在测定条件下每分钟产生1μmol邻硝基苯酚所需的酶量。比活性表示为每毫克蛋白质的单位。在含有100μL酶溶液和5％乳糖的相同缓冲液中进行对乳糖活性的测定，并通过煮沸10分钟终止反应，并使用葡萄糖氧化酶 - 过氧化物酶测定试剂盒测定葡萄糖浓度。通过测量A492定量测定释放的葡萄糖。一个酶活性单位定义为每分钟释放1μmol葡萄糖所需的活性量[1]。

[参考文献]

[1]. Zhang X, et al. Metagenomic approach for the isolation of a thermostable β-galactosidase with high tolerance of galactose and glucose from soil samples of Turpan Basin. BMC Microbiol. 2013 Oct 24;13:237. doi: 10.1186/1471-2180-13-237.

[相关活性小分子]

邻硝基苯-β-D-半乳糖苷物理化学性质

[ 密度 ]:
1.6±0.1 g/cm3

[ 沸点 ]:
572.4±50.0 °C at 760 mmHg

[ 熔点 ]:
186-193 °C (dec.)

[ 分子式 ]:
C₁₂H₁₅NO₈

[ 分子量 ]:
301.249

[ 闪点 ]:
300.0±30.1 °C

[ 精确质量 ]:
301.079773

[ PSA ]:
145.20000

[ LogP ]:
-0.78

[ 外观性状 ]:
白色结晶固体

[ 蒸汽压 ]:
0.0±1.7 mmHg at 25°C

[ 折射率 ]:
1.648

[ 储存条件 ]:
2~8°C

邻硝基苯-β-D-半乳糖苷MSDS

详细MSDS(安全技术说明书)

邻硝基苯-β-D-半乳糖苷安全信息

[ 个人防护装备 ]:
Eyeshields;Gloves;type N95 (US);type P1 (EN143) respirator filter

[ 危害码 (欧洲) ]:
Xi

[ 风险声明 (欧洲) ]:
R36/37/38

[ 安全声明 (欧洲) ]:
S22-S24/25

[ 危险品运输编码 ]:
NONH for all modes of transport

[ WGK德国 ]:
3

[ 海关编码 ]:
29400090

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邻硝基苯-β-D-半乳糖苷海关

[ 海关编码 ]: 29400090

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