LDN-57444

LDN-57444用途

LDN-57444 是一种可逆的,竞争性的,定向位点的泛素 C 末端水解酶 L1 (UCH-L1) 抑制剂,IC50 和 Ki 值分别为 0.88 μM 和 0.40 μM；LDN-57444 同时可抑制 UCH-L3 的活性,IC50 值为 25 μM。

点击显示

LDN-57444名称

[ CAS 号 ]:
668467-91-2

[ 中文名 ]:
LDN-57444

[ 英文名 ]:
LDN-57444

[英文别名 ]:

LDN-57444

LDN-57444生物活性

[ 描述 ]:

[ 相关类别 ]:

信号通路 >> 细胞周期/DNA损伤 >> 去泛素化酶

研究领域 >> 神经疾病

[ 靶点 ]

IC50: 0.88 μM (UCH-L1), 25 μM (UCH-L3)[1] Ki: 0.40 μM (UCH-L1)[1]

[体外研究]

LDN-57444是UCH-L1的可逆竞争性抑制剂,IC50为0.88μM,并且还抑制UCH-L3活性,IC50为25μM[1]。 LDN-57444(LDN,5μM,1小时)抑制小鼠脑海马切片中70％的Uch活性。 LDN-57444(5μM,2小时)不会进一步降低APP/PS1切片或暴露于200nMAβ的wt切片中的增强作用[2]。 LDN-57444(25-100μM)在SK-N-SH细胞中剂量依赖性地抑制遍在蛋白-蛋白酶体活性。 LDN-57444(50μM)也诱导凋亡细胞死亡,引起内质网应激并导致SK-N-SH细胞中剪接的XBP-1(XBP-1s,48KD)的表达[3]。

[体内研究]

LDN-57444(0.4 mg/kg,ip)阻断了V-Uch-L1的有益作用,并且在训练后第1,7,14和21天小鼠暴露于上下文时恶化了背景调节性能[2] 。

[激酶实验]

为了开始测定，将0.5μL的5mg / mL测试化合物（包括LDN-57444，约50μM最终反应浓度）或DMSO对照等分到每个孔中。酶和底物均在UCH反应缓冲液（50mM Tris-HCl [pH 7.6]，0.5mM EDTA，5mM DTT和0.5mg / mL卵清蛋白）中制备。然后向每个孔中加入25μL的0.6nM UCH-L1，除了底物对照孔，然后在自动振荡器上摇板45-60秒。将酶/化合物混合物在室温下孵育30分钟，然后加入25μL的200nM Ub-AMC以引发酶反应。将反应混合物（300μMUCH-L1,100nM泛素-AMC与2.5μg测试化合物）在室温下再孵育30分钟，然后通过每孔加入10μL500mM乙酸淬灭反应。使用香豆素滤光片组（ex = 365nm，em = 450nm）在LJL Analyst上测量荧光发射强度，并通过内在化合物荧光减去荧光发射强度以显示酶活性。 DMSO对照（0.5μLDMSO，25μLUCH-L1,25μL泛素-AMC，10μL乙酸），酶对照（25μLUCH-L1,25μL缓冲液，10μL乙酸）），底物对照（25μL缓冲液，25μL泛素-AMC，10μL乙酸）和抑制剂对照（0.5μL泛素醛[100 nM原液]，25μLUCH-L1,25μL泛素）在每个测定板中也进行-AMC，10μL乙酸）以确保质量和再现性。使用相同的方案手动重复UCH-L1酶促反应两次以确认来自主要机器人辅助筛选的命中化合物的结果[1]。

[细胞实验]

通过MTT的定量比色测定法测量细胞活力。药物处理后，将SK-N-SH细胞与5g / L MTT一起温育4小时，然后加入DMSO 15分钟。使用微量板读数器在570nm处量化吸收[3]。

[动物实验]

将每只动物单独放入调节室中。电流逐渐增加（0.1mA，1秒，30秒间隔，使冲击强度增加0.1mA至0.7mA）。评估动物行为对休克（退缩）的第一次可见反应，第一次极端运动反应（跑/跳）和第一次发声窘迫（尖叫）。通过平均每种动物表现出该类型对足部休克的行为反应的冲击强度，对每只动物量化退缩，跳跃和尖叫的阈值。视觉，运动和动力技能也通过可视平台训练进行测试，测量时间和速度，以达到放置在充满水的池中的可见平台。通过视频跟踪系统记录和分析到达平台和游泳速度的时间。在LDN-57444（LDN）和TAT融合蛋白存在下测试恐惧条件反射的实验中，在不同组的小鼠中没有观察到差异。为了确定LDN-57444的给药时间，进行了一系列初步实验，其中抑制剂以不同的间隔（4小时前，1小时前，1小时后和4小时后）从电中腹膜内注射。休克。在训练阶段，LDN-57444或载体注射小鼠的冷冻没有差异[2]。

[参考文献]

[1]. Liu Y, et al. Discovery of inhibitors that elucidate the role of UCH-L1 activity in the H1299 lung cancer cell line. Chem Biol. 2003 Sep;10(9):837-46.

[2]. Gong B, et al. Ubiquitin hydrolase Uch-L1 rescues beta-amyloid-induced decreases in synaptic function and contextual memory. Cell. 2006 Aug 25;126(4):775-88.

[3]. Tan YY, et al. Endoplasmic reticulum stress contributes to the cell death induced by UCH-L1 inhibitor. Mol Cell Biochem. 2008 Nov;318(1-2):109-15.

[相关活性小分子]

BAY 11-7082 | P005091 | 2,6-二氨基-3,5-二硫氰基吡啶 | VLX1570 | (2E)-3-(6-溴-2-吡啶基)-2-氰基-N-[(1S)-1-苯基丁基]-2-丙烯酰胺 | 1-[5-[(2,4-二氟苯基)硫基]-4-硝基-2-噻吩基]乙酮 | 的DUB-IN-2 | ML364 | (3E,5E)-3,5-二[(4-硝基苯基)亚甲基]-1-(1-氧代-2-丙烯-1-基)-4-哌啶酮 | GEN6776 | ML-323 | HBX 19818 | 1-[1-(4-氟苯基)-2,5-二甲基-1H-吡咯-3-基]-2-(1-吡咯烷基)乙酮 | 4-氰基-5-[(3,5-二氯-4-吡啶基)硫基]-N-[4-(甲基磺酰基)苯基]-2-噻吩甲酰胺

LDN-57444物理化学性质

[ 密度 ]:
1.5±0.1 g/cm3

[ 沸点 ]:
534.4±60.0 °C at 760 mmHg

[ 分子式 ]:
C₁₇H₁₁Cl₃N₂O₃

[ 分子量 ]:
397.640

[ 闪点 ]:
277.0±32.9 °C

[ 精确质量 ]:
395.983521

[ PSA ]:
58.97000

[ LogP ]:
4.70

[ 蒸汽压 ]:
0.0±1.4 mmHg at 25°C

[ 折射率 ]:
1.655

[ 储存条件 ]:
Desiccate at +4°C

[ 水溶解性 ]:
DMSO: soluble16mg/mL

LDN-57444安全信息

[ 符号 ]:

GHS09

[ 信号词 ]:
Warning

[ 危害声明 ]:
H410

[ 警示性声明 ]:
P273-P501

[ 危害码 (欧洲) ]:
N

[ 风险声明 (欧洲) ]:
50/53

[ 安全声明 (欧洲) ]:
60-61

[ 危险品运输编码 ]:
UN 3077 9 / PGIII

LDN-57444文献

A novel functional interplay between Progesterone Receptor-B and PTEN, via AKT, modulates autophagy in breast cancer cells.

J. Cell. Mol. Med. 18(11) , 2252-65, (2014)

The tumour suppressor activity of the phosphatase and tensin homologue on chromosome 10 (PTEN) is subject of intense investigative efforts, although limited information on its regulation in breast can...

Cdt2-mediated XPG degradation promotes gap-filling DNA synthesis in nucleotide excision repair.

Cell Cycle 14(7) , 1103-15, (2015)

Xeroderma pigmentosum group G (XPG) protein is a structure-specific repair endonuclease, which cleaves DNA strands on the 3' side of the DNA damage during nucleotide excision repair (NER). XPG also pl...

NGF-induced TrkA/CD44 association is involved in tumor aggressiveness and resistance to lestaurtinib.

Oncotarget 6 , 9807-19, (2015)

There is accumulating evidence that TrkA and its ligand Nerve Growth Factor (NGF) are involved in cancer development. Staurosporine derivatives such as K252a and lestaurtinib have been developed to bl...

更多文献