Digeranyl bisphophonate

Digeranyl bisphophonate 是一种有效的香叶基焦磷酸香叶酯 (GGPP) 合酶抑制剂,其抑制 Rac1 的香叶酰香叶酰化。

信号通路 >> G 蛋白偶联受体/G 蛋白 >> 拉斯

研究领域 >> 炎症/免疫

Rac1[1]

双锗酸二膦酸酯(DGBP)损害香叶基香叶基化。为了检查二膦酰基二膦酸盐是否调节Rac1活性,将细胞暴露于载体或二膦酸二膦酸酯。温石棉暴露后Rac1活化显着增加,而双膦酸二膦酸盐处理的细胞中的活性降低至对照水平。 Digeranyl bisphosphonate还可以减少温石棉暴露的巨噬细胞中H2O2的产生[1]。

为了进一步评估二锗酰基二膦酸盐(0.2mg/kg /天)在保护小鼠免受温石棉诱导的肺纤维化中的作用,在渗透泵中皮下施用载体或二呋喃基二膦酸盐,并在第二天暴露于盐水或温石棉。暴露于盐水的小鼠具有正常的肺结构,载体和二呋喃基二膦酸盐处理。接受媒介物的温石棉暴露的小鼠在其肺实质和大量胶原沉积中具有显着的结构变化,而双二膦酸二膦酸盐处理的小鼠的肺基本上是正常的。为了研究二锗酰基二膦酸盐在博来霉素诱导的纤维化中的作用,将含有媒介物或二锗基二膦酸盐的渗透泵皮下植入WT小鼠中。第二天将小鼠暴露于盐水或博来霉素。与暴露于博来霉素的媒介物处理的小鼠相比,经过处理的小鼠二膦酸酯(0.2mg/kg /天)显示出显着更少的羟脯氨酸[1]。

使用珠子下拉试剂盒测定Rac1和Rac2活性，或使用G-LISA试剂盒测定Rac1活性。在Rac1和Rac2的PAK结合结构域-GST下拉期间，将阴性和阳性裂解物对照分别与GTPγS或GDP一起温育。洗脱结合的蛋白质并通过SDS-PAGE分离。用对Rac1或Rac2特异的抗体探测免疫印迹，并通过考马斯染色确定GST表达，作为上样对照。活性Rac1也通过使用G-LISA结合固定在96孔板中的Rac1与PAK-PBD珠粒来确定。用Rac1特异性抗体检测结合的活性Rac1。在490nm处读取吸光度并将其标准化为裂解物样品中的蛋白质浓度[1]。

小鼠[1]使用野生型C57Bl / 6小鼠。平衡后，皮下植入含有载体（水）或二锗酸二锗酸盐（0.2mg / kg /天）的渗透泵。使用Rac1 null和Rac2敲除小鼠。简而言之，Rac1缺失小鼠是有条件的并且使用LysMcre产生以从粒细胞/单核细胞谱系的细胞中选择性地缺失Rac1。使用常规基因靶向产生Rac2敲除小鼠以删除Rac2基因，因为Rac2仅在粒细胞/单核细胞谱系的细胞中表达。气管内给予博来霉素（1.3-2.0U / kg）或温石棉（100μg）。对小鼠实施安乐死并确定纤维化。

[1]. Osborn-Heaford HL, et al. Targeting the isoprenoid pathway to abrogate progression of pulmonary fibrosis. Free Radic Biol Med. 2015 Sep;86:47-56.

ARS-853 | ARS-1620 | NSC 23766三盐酸盐 | ML141 | 2-[[(2E,6E)-3,7,11-三甲基-2,6,10-十二烷三烯-1-基]硫代]苯甲酸 | 泛RAS-IN-1 | 盐酸罗红 | CASIN | EHT 1864 | N4-(9-乙基-9H-咔唑-3-基)-N2-[3-(4-吗啉基)丙基]-2,4-嘧啶二胺 | 图1A-116 | CCG-1423 | K-Ras(G12C) inhibitor 12 | ZCL278 | Y16