4-十二烷基-N-1,3,4-噻二唑-2-基苯磺酰胺

PHT-427 是一种 Akt 和 PDPK1 双重抑制剂,与 Akt 和 PDPK1 中的 PH 结构域有亲和性,Ki 分别为 2.7 μM 和 5.2 μM。

研究领域 >> 癌症

Akt:2.7 μM (Ki)

PDPK1:5.2 μM (Ki)

PHPA-427对细胞信号传导的影响通过RPPA使用一组86种抗体来研究PtdIns-3的PC-3前列腺细胞中与PtdIns-3-K/PDPK1/Akt信号传导相关的磷酸化和非磷酸化信号蛋白。由于纯合的PTEN突变,-K/PDPK1/Akt信号被激活。 16小时后,通过10μMPH-427和0.1μM渥曼青霉素在磷酸-Ser241-PDPK1磷酸-Thr308-Akt中观察到减少。最后,通过用PHT-427和Wortmannin处理,磷酸-Ser657-蛋白激酶C(PKC)和总SGK1降低。这些结果表明,在10μM时,PHT-427抑制Akt和PDKP1。 BxPC-3和MiaPaCa-2胰腺癌细胞系在暴露于10μMPHT-427后24小时通过蛋白质印迹探测,其低于IC50,细胞生长抑制约30μM,以确定PHT的作用。 -427 PtdIns-3-K/PDPK1/Akt信号通路组分[1]。

将具有BxPC-3胰腺,MCF-7乳腺或A-549 NSCL癌异种移植物的小鼠通过口服管饲法施用PHT-427或其具有C-4,C-6或C-8烷基链的类似物,每天两次,持续10小时。天。结果显示PHT-427具有最大的抗肿瘤活性,其中C-8链类似物具有较低的活性,而具有C-4或C-6链的类似物具有非常小的活性。使用化合物PHT-427进行所有进一步的抗肿瘤研究。口服给予剂量为200mg/kg的小鼠后PHT-427的血浆水平显示快速吸收,没有迟滞期,给药后1小时Cmax为8.2μg/ mL,消除半衰期为1.4小时。给药后10小时,终末PHT-427浓度为0.1μg/ mL。 PH-427的血浆浓度高于在10μM(4μg/ mL)细胞中抑制Akt和PDPK1信号传导至少3小时的水平[1]。

用绿色荧光蛋白（GFP）标记的Akt或PDKP1 PH结构域稳定转染的Panc-1细胞在玻璃底96孔成像板上的无酚生长培养基中血清饥饿16小时。然后将它们用PHT-427在1,5和10μM或PI-103处理4小时，并用50ng / mL IGF-1刺激10分钟。使用IN Cell Analyzer 1000仪器加载Nikon Plan Fluor ELWD 20X / 0.45物镜并使用300毫秒曝光时间[1]，在IGF-1处理之前和之后拍摄图像。

小鼠[1]给雌性C57Bl / 6小鼠施用PHT-427，单次口服剂量为200mg / kg。在不同时间杀死小鼠（每个时间点3只小鼠），将血液收集到肝素化管中并制备血浆并在-80℃下冷冻保存。为了测定，将0.2mL血浆与0.2mL 0.1M磷酸钠缓冲液（pH4.0）混合，并通过用1ml乙酸乙酯倒置提取1小时。离心后，除去0.8mL有机层，在N 2下蒸发并重新溶解在0.2mL乙醇中，并使用Phenomenex Luna3.0μm，2.0×50mm C8分析柱将10μL注射到Waters Quattro Ultima串联质谱仪上，检测和定量通过在电喷雾正电离模式下操作的质谱仪进行多反应监测。

[1]. Meuillet EJ, et al. Molecular pharmacology and antitumor activity of PHT-427, a novel Akt/phosphatidylinositide-dependent protein kinase 1 pleckstrin homology domain inhibitor. Mol Cancer Ther. 2010 Mar;9(3):706-17.

4-(4-氟苯基)-2-(4-甲基亚磺酰基苯基)-5-(4-吡啶基)-1H-咪唑 | MK-2206 2HCl | 2-氨基-6-氯-alpha-氰基-3-(乙氧羰基)-4H-1-苯并吡喃-4-乙酸乙酯 | Capivasertib (AZD5363) | 和厚朴酚 | 1,3-二氢-1-[1-[4-(6-苯基-1H-咪唑并[4,5-g]喹喔啉-7-基)苯基甲基]-4-哌啶基]-2H-苯并咪唑-2-酮(AKT抑制剂VIII) | Ipatasertib | 土大黄甙 | Uprosertib | 1,3-二咖啡酰奎宁酸 | TIC10 | 曲西立滨 | Perifosine (KRX-0401) | Afuresertib | (ALPHAS)-ALPHA-[[[5-(3-甲基-1H-吲唑-5-基)-3-吡啶基]氧基]甲基]-(S)-1H-吲哚-3-乙胺