JW74

JW74 拮抗 LiCl 诱导的经典 Wnt 信号传导的激活,IC50 为 420 nM。

信号通路 >> 干细胞及 Wnt 通路 >> Wnt信号

研究领域 >> 癌症

IC50: 420 nM (Wnt)[1]

JW74显示ST-Luc测定中经典Wnt信号传导的减少,IC50为790 nM [1]。通过进行MTS测定来测试端锚聚合酶抑制对细胞活力的影响。相对于DMSO处理的细胞,用10μMJW74处理72小时处理的U2OS细胞的细胞活力降低至80％。还进行流式细胞术以确定用DMSO或10uM JW74处理48小时后U2OS中的表达标志物Ki-67。 Ki-67表达从DMSO处理的细胞中的97.5％降低到JW74处理的细胞中的86.7％[2]。

使用SW480细胞异种移植物测试JW74的体内功效。使用相对高剂量的JW74(150或300mg/kg),因为如人肝微粒体分析(t1/2 = 2.5分钟)和药代动力学分析(每次口服注射后)中生物体中的快速化合物降解：t1/2 = 30分钟并静脉注射：t1/2 = 15分钟)。通过质谱法鉴定JW74在肿瘤和血浆中的存在。 JW74 150 mg/kg的JW74浓度范围为4.2至72.1μmol/ kg,JW74 300 mg/kg为1.9至11.1μmol/ kg,两种剂量的血浆均为2.8μM[1]。

细胞系U2OS，SaOS-2和KPD在RPMI-1640中培养。用含有0.1％DMSO（对照）或JW74（10-0.1μM）的培养基处理在96孔板中过夜的2至3千个细胞。基于细胞汇合的增殖率由活细胞成像确定。细胞活力也通过MTS测定确定。通过用PE-小鼠抗人Ki-67染色细胞并通过流式细胞术分析表达来进行增殖标志物Ki-67的表达[2]。

小鼠[1] 40只雌性CB-Igh-1b / IcrTac-Prkdcscid小鼠在右后侧皮下（sc）注射用100μLPBS稀释的107个SW480细胞。当在50％的动物中可见肿瘤形成时（7天），开始注射。将小鼠随机分成三个治疗组：JW74 150 mg / kg，JW74 300 mg / kg和载体对照，1％吐温80.每日腹腔内（ip）注射（200μL），每第五次注射后注射间隔两天进行一天直到实验结束（29天）。在最后一次注射后24小时的终止日，在心脏穿刺后收集血液并解剖肿瘤并称重。使用与飞行时间（TOF）质谱仪耦合的在线和离线固相萃取 - 毛细管液相色谱（SPE-CapLC）仪器测定肿瘤和血液中的化合物浓度。使用Zorbax SB C185μm150×0.3 mm色谱柱进行分离，使用Knauer K-2600 UV检测器作为补充检测器。

[1]. Waaler J, et al. Novel synthetic antagonists of canonical Wnt signaling inhibit colorectal cancer cell growth. Cancer Res. 2011 Jan 1;71(1):197-205.

[2]. Stratford EW, et al. The tankyrase-specific inhibitor JW74 affects cell cycle progression and induces apoptosis and differentiation in osteosarcoma cell lines. Cancer Med. 2014 Feb;3(1):36-46.

2,3-二氢-1,4-苯并恶嗪 | 盐霉素 | IWR-1-endo | Wnt-C59 | 盐酸小檗碱水合物 | 扑蛲灵 | ETC-159 | CID11210285 盐酸盐 | IWP 2 | 硫酸类肝素 | KYA1797K | 2,5-二氯-N-(2-甲基-4-硝基苯基)苯磺酰胺 | SKL2001 | 8-[3-氯-5-[4-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)苯基]-4-吡啶基]-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-1-酮 | iCRT 14