Ipatasertib

Ipatasertib (GDC-0068) 是一种选择性,竞争性的 pan-Akt 抑制剂,抑制 Akt1,Akt2,Akt3 的 IC50 分别为 5,18,8 nM。

信号通路 >> PI3K/Akt/mTOR 信号通路 >> AKT

研究领域 >> 癌症

Akt1:5 nM (IC50)

Akt2:18 nM (IC50)

Akt3:8 nM (IC50)

PKA:3100 nM (IC50)

Ipatasertib(GDC-0068)显示IC50中Akt1对密切相关的激酶PKA和p70S6K的选择性超过600倍且超过100倍。当在包含36个人AGC家族成员的230种蛋白激酶组中以1μM进行测试时,GDC-0068在1μM浓度下仅抑制3种其他激酶超过70％(PRKG1α,PRKG1β和p70S6K)。测量这3种激酶的IC50分别为98,69和860nM。因此,除了PKG1(相对于Ipatasertib(GDC-0068)对Akt1的选择性> 10倍),Ipatasertib(GDC-0068)对Akt1的选择性超过100倍,而下一个最有效抑制筛选激酶组中的非Akt激酶,p70S6K。在3种异种移植模型中研究了Ipatasertib(GDC-0068)的药代动力学(PK)和药效学(PD)之间的关系,其显示出对药物治疗的剂量依赖性反应：MCF7-neo/HER2,TOV-21G.x1和LNCaP。这3个细胞系中GDC-0068的平均细胞存活率IC50分别为2.56,0.44和0.11μM[2]。

Ipatasertib(GDC-0068)在异种移植模型中通常是有效的,其中Akt由于遗传改变而被激活,包括PTEN缺失,PIK3CA突变/扩增或HER2过表达。在这些模型中,肿瘤生长延迟,停滞或消退达到或低于100mg/kg每日口服剂量,这是在耐受性良好的免疫受损小鼠中测试的最大剂量。在体内测试时,每日给予Ipatasertib(GDC-0068)与多西紫杉醇联合诱导PC-3和MCF7-neo/HER2异种移植模型中的肿瘤消退和停滞,剂量为每种单一药物无效或仅引起适度肿瘤增长延迟。类似地,当Ipatasertib(GDC-0068)与卡铂组合时,在OVCAR3卵巢癌异种移植模型中观察到增加的TGI。与单独使用每种化疗药物治疗相比,Ipatasertib(GDC-0068)与多西紫杉醇或卡铂的组合耐受,体重减轻不到5％[2]。

向384孔板接种每孔2,000个细胞，体积为54μL/孔，然后在37℃，5％CO 2下孵育过夜（约16小时）。将化合物（例如，Ipatasertib（GDC-0068））在DMSO中稀释以产生所需的储备浓度，然后以每孔6μL的体积加入。所有治疗均一式四份进行测试。孵育4天后，使用CellTiter-Glo估计活细胞的相对数量，并在Wallac Multilabel Reader上测量总发光。由4参数曲线分析（XLfit）计算导致IC50的药物浓度，并且从最少3次实验确定。对于未达到IC50的细胞系，列出了测试的最高浓度（10μM）[2]。

小鼠[2]在多种肿瘤细胞系和患者来源的异种移植模型中评估体内功效。将细胞或肿瘤片段皮下植入免疫功能不全的小鼠的侧腹。使用雌性或雄性裸（nu / nu）或严重联合免疫缺陷小鼠（SCID）/米色小鼠。对于MCF7-neo / HER2模型，在细胞接种前将17β-雌二醇颗粒（0.36mg /沉淀，60天释放）植入背肩。获得LuCaP35V患者来源的原发性肿瘤;在植入肿瘤碎片之前将雄性小鼠阉割。在将肿瘤细胞或片段植入小鼠后，监测肿瘤直至它们达到180-350mm 3的平均肿瘤体积并分成8-10只动物/组的组。将Ipatasertib（GDC-0068）配制在0.5％甲基纤维素/0.2%吐温-80（MCT）中，并通过口服（口服; PO）灌胃每日（QD）给药。多西紫杉醇在3％EtOH / 97％盐水中配制，并且每周静脉内（IV）给药（QW）2.5或7.5mg / kg。卡铂在盐水中配制并且每周以50mg / kg腹膜内（IP）给药。

[1]. Blake JF, et al. Discovery and preclinical pharmacology of a selective ATP-competitive Akt inhibitor (GDC-0068) for the treatment of human tumors. J Med Chem. 2012 Sep 27;55(18):8110-27.

[2]. Lin J, et al. Targeting activated Akt with GDC-0068, a novel selective Akt inhibitor that is efficacious in multiple tumor models. Clin Cancer Res. 2013 Apr 1;19(7):1760-72.

4-(4-氟苯基)-2-(4-甲基亚磺酰基苯基)-5-(4-吡啶基)-1H-咪唑 | MK-2206 2HCl | 2-氨基-6-氯-alpha-氰基-3-(乙氧羰基)-4H-1-苯并吡喃-4-乙酸乙酯 | Capivasertib (AZD5363) | 和厚朴酚 | 1,3-二氢-1-[1-[4-(6-苯基-1H-咪唑并[4,5-g]喹喔啉-7-基)苯基甲基]-4-哌啶基]-2H-苯并咪唑-2-酮(AKT抑制剂VIII) | 土大黄甙 | Uprosertib | 1,3-二咖啡酰奎宁酸 | TIC10 | 曲西立滨 | Perifosine (KRX-0401) | Afuresertib | (ALPHAS)-ALPHA-[[[5-(3-甲基-1H-吲唑-5-基)-3-吡啶基]氧基]甲基]-(S)-1H-吲哚-3-乙胺 | 野黄芩苷