氯硝柳胺一水合物

Niclosamide monohydrate 是一种 STAT3 抑制剂,在 HeLa 细胞中,IC50 值为 0.25 μM,可以抑制 DNA 复制。

研究领域 >> 感染

STAT3:0.25 μM (IC50, in HeLa cells)

氯硝柳胺一水合物是STAT3的抑制剂,抑制STAT3介导的荧光素酶报告基因活性,在HeLa细胞中IC50为0.25μM。氯硝柳胺(1μM)抑制EGF诱导的Du145细胞中STAT3的核转位。氯硝柳胺(<2μM)剂量依赖性地抑制Du145细胞中STAT3下游基因的转录。氯硝柳胺(<10μM)以剂量依赖的方式诱导Du145癌细胞的G0/G1停滞和凋亡[1]。氯硝柳胺可以在感染SARS-CoV的Vero E6细胞中以微摩尔浓度阻断SARS-CoV复制[2]。氯硝柳胺(<7.5μM)促进Frizzled1内吞作用,下调Disheveled-2蛋白,并抑制Wnt3A刺激的U2OS细胞中β-catenin稳定和LEF/TCF报告基因活性[3]。氯硝柳胺在U2OS细胞中以剂量和时间依赖性方式抑制TNF诱导的NF-κB报告基因活性。氯硝柳胺(125nM)抑制U2OS细胞中p65,IKKα,IKKβ,IKKγ和TAK1诱导的NF-κB活化。氯硝柳胺(<500nM)完全阻断时间和剂量依赖性TNFα诱导的HL-60细胞中NF-κB-DNA复合物的改变。氯硝柳胺(<10nM)抑制U266细胞中的组成型NF-κB活化。氯硝柳胺在HL-60,Molm13或AML原代细胞中以剂量和时间依赖性方式抑制TNF诱导的IκBα降解和p65的重新定位。氯硝柳胺(500nM)引起TNF诱导的NF-κB依赖性基因产物的减少,所述基因产物参与HL-60细胞中的细胞存活。氯硝柳胺还抑制生长并诱导与Mcl-1和XIAP水平降低以及细胞内ROS水平升高相关的AML细胞的强烈凋亡[4]。

氯硝柳胺(40mg/kg/d,ip)抑制携带HL-60异种移植肿瘤的裸鼠中异种移植的AML细胞的生长[4]。

所有蛋白激酶在Sf9昆虫细胞或大肠杆菌中表达为重组GST-融合蛋白或His-标记的蛋白。放射性蛋白激酶测定法用于测量22种蛋白激酶的激酶活性。简而言之，对于每种蛋白激酶，50μL反应混合物含有60mM HEPES-NaOH，3mM MgCl 2,3mM MnCl2,3μM原钒酸钠，1.2mM DTT，50μg/ mLPEG20000,1μM[γ-33P] - ATP，氯硝柳胺，足量的酶及其底物。 PKC-α测定另外含有1mM CaCl 2,4mM EDTA，5μg/ mL磷脂酰丝氨酸和1μg/ mL 1,2-二油基甘油。将反应混合物在37℃下孵育60分钟并用50μL2％（v / v）H 3 PO 4终止。用微孔板闪烁计数器测定33Pi的掺入。使用Quattro Workflow V2.28计算活动和IC50值。

将细胞接种于96孔培养板中，细胞密度为3-4×103细胞/孔，并在第二天通过加入100μL含有各种浓度的氯硝柳胺的培养基用氯硝柳胺处理。处理72小时后，向每个孔中加入MTT并再孵育4-5小时，并在酶标仪上在570nm处测量吸光度。将细胞生长抑制评估为样品的吸光度与对照的吸光度之比。结果代表至少3次独立实验。

雄性nu / nu BALB / c小鼠在中山大学的动物设施中繁殖。将HL-60细胞皮下接种在4至6周龄小鼠的侧腹上。每隔一天使用卡尺测量肿瘤。将携带HL-60异种移植物的小鼠随机化以接受用生理盐水（对照）或对氯硝柳胺处理15天（每组n = 7只动物）。肿瘤体积通过下式计算：a2×b×0.4，其中a是最小直径，b是垂直于a的直径。在小鼠实施安乐死后，解剖，称重或保存异种移植物。

[1]. Ren, X., et al., Identification of niclosamide as a new small-molecule inhibitor of the STAT3 signaling pathway. ACS Medicinal Chemistry Letters, 2010. 1(9): p. 454-459.

[2]. Wu CJ, et al. Inhibition of severe acute respiratory syndrome coronavirus replication by niclosamide. Antimicrob Agents Chemother. 2004 Jul;48(7):2693-6.

[3]. Chen, M., et al., The anti-helminthic niclosamide inhibits Wnt/Frizzled1 signaling. Biochemistry, 2009. 48(43): p. 10267-74.

[4]. Jin, Y., et al. Antineoplastic mechanisms of niclosamide in acute myelogenous leukemia stem cells: inactivation of the NF-kappaB pathway and generation of reactive oxygen species. Cancer Res, 2010. 70(6): p. 2516-27.

Tyrphostin B42 (AG-490) | Stattic | AS1517499 | NSC 74859 | 隐丹参酮 | 癌细胞干抑制剂(Napabucasin) | 高三尖杉酯碱 | STAT5-IN-1 | (2E)-3-(6-溴-2-吡啶基)-2-氰基-N-[(1S)-1-苯基乙基]-2-丙烯酰胺 | 氯硝柳胺 | BP-1-102 | 野黄芩苷 | SH-4-54 | HO-3867 | 青蒿琥酯； 青蒿脂