< 生产厂家价格 >

4-[3-氧代-3-(2-氧代-2,3-二氢苯并恶唑-6-基)丙基]哌嗪-1-羧酸 3,5-二氯苄酯

用途

PF-8380 是一种有效的 autotaxin 抑制剂,体外酶实验和人类全血细胞实验中,IC50 分别为 2.8 nM 和 101 nM。

点击显示

名称

[ CAS 号 ]:
1144035-53-9

[ 中文名 ]:
4-[3-氧代-3-(2-氧代-2,3-二氢苯并恶唑-6-基)丙基]哌嗪-1-羧酸 3,5-二氯苄酯

[ 英文名 ]:
PF-8380

[英文别名 ]:

PF-8380

生物活性

[ 描述 ]:

PF-8380 是一种有效的 autotaxin 抑制剂,体外酶实验和人类全血细胞实验中,IC50 分别为 2.8 nM 和 101 nM。

[ 相关类别 ]:

信号通路 >> 代谢酶/蛋白酶 >> 磷酸二酯酶(PDE)

研究领域 >> 炎症/免疫

研究领域 >> 癌症

[ 靶点 ]

IC50: 2.8 nM (Autotaxin)[1]

[体外研究]

PF-8380还抑制大鼠自分泌运动因子,FS-3底物的IC50为1.16 nM。当使用由与溶血磷脂酰胆碱(LPC)组合使用的胎儿成纤维细胞产生的酶作为底物时,保持PF-8380的效力。在用PF-8380孵育2小时的人全血中,自分泌运动因子受到抑制,IC50为101 nM [1]。自分泌运动因子(ATX)是一种具有溶血磷脂酶D(lysoPLD)活性的酶,催化溶血磷脂酰胆碱(LPC)产生溶血磷脂酸(LPA)。用1μMPF-8380预处理GL261和U87-MG细胞,然后进行4Gy照射,导致克隆形成存活率降低,迁移减少(GL261中33％; U87-MG中P = 0.002和17.9％; P = 0.012) ,减少侵袭(GL261中35.6％; U87-MG中P = 0.0037和31.8％; P = 0.002),并减弱辐射诱导的Akt磷酸化[2]。

[体内研究]

PF-8380的药代动力学特征以1mg/kg的静脉内剂量和1至100mg/kg的口服剂量评估至24小时。 PF-8380的平均清除率为31 mL/min/kg,稳定状态下的分布容量为3.2 L/kg,有效t1/2为1.2 h。口服生物利用度适中,范围为43％至83％。单次口服递增剂量时血浆浓度增加,但Cmax以1至10mg/kg的剂量大约与剂量成比例增加,并且与10至100mg/kg的剂量成比例。根据曲线下面积估算的PF-8380暴露量与剂量大致成比例,线性度高达100 mg/kg。收集后立即测量血浆C16：0,C18：0和C20：0 LPA水平。在0.5小时时3mg/kg剂量观察到LPA水平的最大降低,所有LPA在24小时返回基线或高于基线[1]。用10mg/kg PF-8380治疗使肿瘤相关血管分布适度增加20％(P = 0.497)。与对照组相比,在4 Gy照射前45分钟处理PF-8380与对照组相比,血管性降低了近48％(P = 0.031),与单独接受放射的小鼠相比,降低了65％[P = 0.011] [2] ]。

[激酶实验]

将FS-3底物以500μM溶解于测定缓冲液中，并在-20℃下以一次性等分试样冷冻最多4周。将重组自分泌运动因子在Tris缓冲盐水（140mM NaCl，5mM KCl，1mM CaCl 2,1mM MgCl 2,50mM Tris，pH 8.0）中稀释，并与化合物在DMSO或DMSO中单独孵育（最终1％DMSO）15在37℃下最小化，并且通过添加终浓度为1μM的FS-3开始反应。使反应在37℃下进行30分钟并在520nm下监测，直至未抑制的对照与无酶对照相比，得到Z'≥0.5。通过使用四参数拟合[1]确定IC50一式三份。

[细胞实验]

将HUVEC（1×106）和bEnd.3细胞（1×106）铺板于100mm平板中，24小时后，将U87-MG（2×106）和GL261（2×106）细胞接种到transwell插入物上。共培养24小时后，在用0,2,4,6或8Gy照射之前，用1μMPF-8380或载体对照DMSO处理细胞45分钟。在与PF-8380或DMSO共培养的处理之后，计算数量的U87-MG和GL261细胞被电镀以使电镀效率标准化。培养7至10天后，将板用70％EtOH固定，并用1％亚甲蓝染色。通过在显微镜下观察平板计数由> 50个细胞组成的集落。存活分数计算为（菌落数/接种细胞数）/（相应对照的菌落数/接种的细胞数）。通过曲线拟合分析生存曲线，计算D0和n [2]的α/β模型。

[动物实验]

大鼠[1]使用体重为275至300g的雄性Lewis大鼠并使其适应环境约1周，随意提供食物和水。在研究前至少1天，用异氟烷麻醉动物（起作用）并在颈动脉中植入Culex血管导管。在给药前，将动物在Culex笼中适应过夜。通过使用Culex自动血液采样器的“趋向”功能来维持颈动脉导管的通畅性。在禁食过夜后，通过口服强饲法给动物以1,3,10,30和100mg / kg给予PF-8380。从颈动脉获得血液收集并且在施用后0.25,0.5,1,2,4,6,8和24小时由Culex自动血液采样器进行。将血液离心，收集血浆用于分析PF-8380和LPA浓度。将小鼠[2] GL261细胞（1×106）注射到裸鼠的右后肢。一旦肿瘤可触知，将小鼠蛇纹石分成6至7只动物的组，代表相似的肿瘤大小分布（范围= 240mm 3）。携带肿瘤的小鼠腹膜内注射10mg / kg体重的载体（DMSO）或PF-8380，每天一次，连续5天。药物注射后45分钟，用异氟烷麻醉小鼠并将其置于RS2000辐照器中。然后每天用2Gy照射它们连续5天，总共10Gy。铅块（10毫米厚）用于保护头部，胸部和腹部。使用外部可追踪数字卡尺纵向监测肿瘤大小。一旦肿瘤达到约10mm 3的体积或当溃疡变得明显时，通过颈脱位处死小鼠。

[参考文献]

[1]. Gierse J, et al. A novel autotaxin inhibitor reduces lysophosphatidic acid levels in plasma and the site of inflammation. J Pharmacol Exp Ther. 2010 Jul;334(1):310-7.

[2]. Bhave SR, et al. Autotaxin Inhibition with PF-8380 Enhances the Radiosensitivity of Human and Murine Glioblastoma Cell Lines. Front Oncol. 2013 Sep 17;3:236.

[3]. Cao P, et al. Autocrine lysophosphatidic acid signaling activates β-catenin and promotes lung allograft fibrosis. J Clin Invest. 2017 Apr 3;127(4):1517-1530.

[相关活性小分子]

物理化学性质

[ 密度 ]:
1.4±0.1 g/cm3

[ 分子式 ]:
C₂₂H₂₁Cl₂N₃O₅

[ 分子量 ]:
478.325

[ 精确质量 ]:
477.085815

[ PSA ]:
95.85000

[ LogP ]:
3.63

[ 折射率 ]:
1.616

[ 储存条件 ]:
-20°C

MSDS

详细MSDS(安全技术说明书)

安全信息

[ 危害声明 ]:
H413

[ 危险品运输编码 ]:
NONH for all modes of transport