5-[2-(叔丁基)-4-(4-氟苯基)-1H-咪唑-5-基]-3-(2,2-二甲基丙基)-3H-咪唑并[4,5-B]吡啶-2-胺甲磺酸盐

Ralimetinib dimesylate (LY2228820) 是一种选择性,ATP竞争性的 p38 MAPK α/β 抑制剂,IC50 分别为5.3 和 3.2 nM。

信号通路 >> MAPK/ERK信号通路 >> p38 MAPK

研究领域 >> 癌症

IC50: 7 nM (p38 MAPK)

Ralimetinib dimesylate(LY2228820)抑制RAW 264.7细胞中的p38α以及磷酸化MAPKAPK-2(pMK2)的水平,IC50值分别为7 nM和34.3 nM。此外,Ralimetinib dimesylate(LY2228820)抑制脂多糖(LPS)诱导的小鼠腹腔巨噬细胞中TNFα的形成,IC50为5.2 nM [1]。在多发性骨髓瘤(MM)细胞中,包括INA6,RPMI-8226,U266和RPMI-Dox40,Ralimetinib dimesylate(LY2228820)(200 nM-800 nM)显着阻断p38MAPK信号传导,正如其对HSP27磷酸化的抑制所揭示的, p38MAPK的下游靶标,不影响HSP27的表达水平。雷米替尼二甲磺酸盐(LY2228820)(200nM-400nM)增强硼替佐米诱导的细胞毒性和细胞凋亡,但单独的雷米单抗二甲磺酸盐(LY2228820)不抑制MM.1S细胞的生长。 Ralimetinib dimesylate(LY2228820)(200 nM-800 nM)也抑制长期BM基质细胞(LT-BMSCs),BM单核细胞(BMMNCs),外周血(PB)CD138 +中IL-6和MIP-1α的分泌, CD138-或PB CD14 +细胞。 Ralimetinib dimesylate(LY2228820)(400 nM-800 nM)也可阻断CD14 +细胞的破骨细胞生成[2]。

在LPS诱导的小鼠中,Ralimetinib dimesylate(LY2228820)有效抑制TNFα的形成,阈值最小50％有效剂量(TMED50)小于1mg/kg。在胶原诱导的关节炎(CIA)的大鼠模型中,雷帕霉素二甲磺酸盐(LY2228820)对爪肿胀,骨侵蚀和软骨破坏显示出有效作用,阈值最小50％有效剂量(TMED50)为1.5 mg/kg [1] 。雷洛替尼二甲磺酸盐(LY2228820)在植入B16-F10黑素瘤的小鼠中以剂量依赖性方式(TED50 = 1.95mg/kg,TED70 = 11.17mg/kg)抑制肿瘤磷酸化-MK2。 Ralimetinib dimesylate(LY2228820)抑制MK2磷酸化：小鼠体内TED50 = 1.01 mg/kg(化合物暴露约100 nM),人体外PC50 =0.12μM与小鼠或人PBMC [3]。

使用重组人p38α在标准滤器结合方案中使用ATP [γ-33P]和EGFR 21-mer肽作为底物测定p38α的抑制。在LY2228820存在下使用LPS刺激测定鼠腹膜巨噬细胞中TNFα的功能性抑制。为了更直接地评估细胞中的p38α活性，用LY2228820处理RAW 264.7细胞，然后用茴香霉素刺激。使用磷酸MTAPAPK-2（pMK2）（Thr 334）抗体检测p38α活性水平，该抗体与p38α特异性磷酸化的残基反应。

在补充有1-谷氨酰胺，高葡萄糖和10％FBS（GIBCO 11965-092）的Dulbecco's改良Eagle培养基中培养鼠B16-F10黑素瘤细胞。 C57 / bl6小鼠在后侧植入B16-F10细胞（2×106），当肿瘤大小达到约200mm3时，在1％羧甲基纤维素/0.25%吐温80中口服雷米氨酸二甲磺酸盐。给药后2小时，切除肿瘤，均质化并裂解用于Western印迹分析。通过化学发光检测定量标准化为总甘油醛-3-磷酸脱氢酶的MK2磷酸化（p-Thr334）。计算50％或70％阈值有效剂量（分别为TED50和TED70）以接近用于在异种移植物模型中测试雷米替尼二甲磺酸盐的有效剂量范围，即，观察到显着的靶抑制。 TED50或TED70定义为实现统计学显着效果的剂量，并且与载体对照相比分别具有至少50％或70％的抑制。

[1]. Mader M, et al. Imidazolyl benzimidazoles and imidazo[4,5-b]pyridines as potent p38alpha MAP kinase inhibitors with excellent in vivo antiinflammatory properties. Bioorg Med Chem Lett, 2008, 18(1), 179-183.

[2]. Ishitsuka K, et al. p38 mitogen-activated protein kinase inhibitor LY2228820 enhances bortezomib-induced cytotoxicity and inhibits osteoclastogenesis in multiple myeloma; therapeutic implications. Br J Haematol, 2008, 141(5), 598-606.

[3]. Campbell RM, et al. Characterization of LY2228820 dimesylate, a potent and selective inhibitor of p38 MAPK with antitumor activity. Mol Cancer Ther. 2014 Feb;13(2):364-74.

[4]. Zhang Y, et al. PP2AC Level Determines Differential Programming of p38-TSC-mTOR Signaling and Therapeutic Response to p38-Targeted Therapy in Colorectal Cancer. EBioMedicine. 2015 Nov 19;2(12):1944-56.

4-(4-氟苯基)-2-(4-甲基亚磺酰基苯基)-5-(4-吡啶基)-1H-咪唑 | SB202190 (FHPI) | 多马莫德 | SB 239063 | 6-[5-(环丙基氨基甲酰基)-3-氟-2-甲基苯基]-N-(2,2-二甲基丙基)吡啶-3-甲酰胺 | PD 169316 | 他匹莫德 | TAT-NR2B9c的 | 盐酸脱氢紫堇碱 | N-(4-(2-乙基-4-(3-甲基苯基)噻唑-5-基)吡啶-2-基)苯甲酰胺 | 6-[(氨基羰基)(2,6-二氟苯基)氨基]-2-(2,4-二氟苯基)-3-吡啶甲酰胺 | Neflamapimod | 6-(4-氟苯基)-5-(4-吡啶基)-2,3-二氢咪唑并[2,1-B]-噻唑 | 阿库马莫德 | 3-溴-4-(2,4-二氟苄氧基)-1-[5-[(甲基氨基)羰基]-2-甲基苯基]-6-甲基吡啶-2(1H)-酮