(2S)-2-(3-氨基丙基)-5-(2,5-二氟苯基)-N-甲氧基-N-甲基-2-苯基-1,3,4-噻二唑-3(2H)-甲酰胺

Filanesib (ARRY-520) 是一种合成的纺锤体驱动蛋白 (KSP) 抑制剂,IC50 值为 6 nM。

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KSP:6 nM (IC50)

Filanesib(ARRY-520)在多药耐药细胞系中保留活性。 Filanesib(ARRY-520)抑制HCT-15,NCI/ADR-RES和K562/ADR细胞增殖的EC50分别为3.7,14和4.2nM。 Filanesib(ARRY-520)(10 nM)通过KSP抑制的典型单极纺锤体结构阻断有丝分裂中的大部分细胞[1]。 Filanesib(ARRY-520)(10 nM)通过增加组蛋白H3磷酸化(pHH3)和细胞周期蛋白B1在四个细胞中的积累来诱导有丝分裂停滞[2]。 Filanesib(ARRY-520)和紫杉醇对I型和II型细胞表现出相同的细胞毒性作用。对于ARRY-520,II型EOC细胞48小时的GI50为0.0015μM。对于I型EOC细胞,ARRY-520的48小时GI50>3μM[3]。 Filanesib(ARRY-520)(1 nM)在24小时时在OCI-AML3细胞中诱导显着的G2M细胞周期阻滞[4]。

Filanesib(ARRY-520)(10,15,20,30 mg/kg,ip)在UISO-BCA-1异种移植物中有活性,在携带皮下HT-29,HCT-116,MDA-MB的小鼠中也优于紫杉醇-231和A2780异种移植物。 ARRY-520在雄激素受体阴性前列腺癌异种移植模型PC-3中优于多西紫杉醇,并且在DU145前列腺异种移植模型中也优于多西紫杉醇[1]。 RPMI 8226肿瘤异种移植物对低剂量的ARRY-520(12.5 mg/kg,ip)特别敏感[2]。 ARRY-520分别以27mg/kg和20mg/kg的浓度显着抑制SCID小鼠HL60和MV4-11异种移植物中的肿瘤生长[4]。

用Filanesib（ARRY-520）处理指数生长的细胞（0.4×106 / mL）长达48小时。对于组合，将HL-60和HL-60Bcl-2细胞（0.4×106 / mL）与Filanesib（ARRY-520），ABT-737或两者一起孵育长达96小时。 DMSO用作控制剂。通过用Annexin-V-FLUOS染色试剂盒测量磷脂酰丝氨酸的流式细胞术来估计细胞凋亡。通过7-氨基 - 放线菌素D（7-AAD）同时评估膜完整性。为了测量线粒体膜电位（MMP）的变化，将细胞用CMXRos（300nM）和MitoTracker Green（500nM）在37℃下加载1小时。然后通过测量CMXRos保留同时调整线粒体质量来评估MMP的丧失。

使皮下肿瘤异种移植物生长至250-350mm 3的体积。根据肿瘤大小将小鼠随机分成3-4组，并给予单剂量的Filanesib（ARRY-520）ip。在给药后的不同时间点，通过吸入CO2和肿瘤对小鼠实施安乐死。切下并置于10％中性缓冲福尔马林中。通过标准程序处理福尔马林固定的肿瘤并石蜡包埋。通过对α-微管蛋白的肿瘤切片进行染色来分析纺锤体形态，并通过TUNEL染色分析细胞凋亡。在每个样品的3×40个视野中计数单极/异常纺锤体和TUNEL阳性（凋亡）细胞，使用ImagePro软件中开发的算法进行分析。

[1]. Woessner R, et al. ARRY-520, a novel KSP inhibitor with potent activity in hematological and taxane-resistant tumor models. Anticancer Res. 2009 Nov;29(11):4373-80.

[2]. Tunquist BJ, et al. Mcl-1 stability determines mitotic cell fate of human multiple myeloma tumor cells treated with the kinesin spindle protein inhibitor ARRY-520. Mol Cancer Ther. 2010 Jul;9(7):2046-56.

[3]. Kim KH, et al. KSP inhibitor ARRY-520 as a substitute for Paclitaxel in Type I ovarian cancer cells. J Transl Med. 2009 Jul 20;7:63.

[4]. Carter BZ, et al. Inhibition of KSP by ARRY-520 induces cell cycle block and cell death via the mitochondrial pathway in AML cells. Leukemia. 2009 Oct;23(10):1755-62.

GSK-923295 | 伊斯平斯 | Kif15-IN-1 | 星素 | Kif15-IN-2 | Litronesib | CW-069 | K858外消旋 | SB 743921 | ARRY-520 R对映体 | AZ82 | Eg5抑制剂V,trans-24 | EMD534085 | Paprotrain