BV6

BV6 是cIAP1 和 XIAP拮抗剂。

信号通路 >> 细胞凋亡 >> IAP

研究领域 >> 癌症

IAP[1]

HCC193在MTS测定中具有7.2μM的IC50,而即使用30μMBV6处理,H460细胞也未降低至50％存活率。向治疗后1小时施用1μMBV6至HCC193细胞诱导cIAP1水平的完全消耗,而在加入药物后24小时未观察到XIAP水平的降低。类似地,5μMBV6在1小时时完全耗尽cIAP1并且在H460细胞中在24小时开始减少XIAP。在平行发现中,cIAP1水平响应于两种细胞系中的小剂量0.25μMBV6而降低,而痕量的XIAP仍然存在于5μMMV6。在用1μMBV6孵育后12小时开始,HCC193细胞显示出显着的裂解的半胱天冬酶-3水平,并且裂解的半胱天冬酶-3水平在48小时内以时间依赖性方式继续增加。用1μMBV6处理HCC193细胞24小时导致HCC193细胞相对于DMSO处理的细胞显着存活曲线移位,DER = 1.38(p <0.05)[1]。 BV6(2和5μM)显着抑制异位和在位(无病和肌瘤)ESC中的BrdU掺入。在用5μMBV6处理后,在两组中观察到BrdU掺入减少~30％[2]。

在植入物的上皮细胞和基质细胞的细胞质中清楚地观察到鼠cIAP-1,cIAP-2和XIAP表达,而存活蛋白主要在细胞核BV6处理中表达4周,减弱了IAP表达的强度。病变的大小直径在约2至7毫米之间。显示了囊肿的单层上皮细胞衬里。免疫组织化学染色后,细胞角蛋白和波形蛋白染色阳性,而calretinin阴性。在BV6治疗4周后,病变总数(4.6对2.8 /小鼠),平均体重(78.1对32.0 mg /小鼠)和表面积(44.5对24.6 mm2 /小鼠)的病变明显少于控制。在子宫内膜腺上皮或基质中,BV6处理后Ki67阳性细胞的百分比降低[2]。

在补充有10％胎牛血清和1％青霉素/链霉素的RPMI-1640中培养H460和HCC193细胞系。使用CellTiter 96 Aqueous Non-Radioactive Cell Proliferation Assay试剂盒测量细胞活力。将5000个细胞/孔一式三份接种到96孔板中。在将细胞粘附到孔中之后，将增加浓度的BV6添加到不同的孔中。对照组暴露于相同浓度的DMSO。 24小时后，将每种孔中加入333μg/ mL MTS和25μMPMS的终浓度。在37℃，湿润的5％CO 2中孵育2小时后，在酶标仪上以490nm的吸光度读板。通过将它们的吸光度标准化为相应对照的吸光度来计算单个样品的相对细胞活力。使用Prism 5.01计算IC 50值。对于TNFα中和抗体测定，将细胞暴露于含有或不含有10μg/ mL英夫利昔单抗的1和5μMBV6，并在24小时后进行测定。在酶标仪[1]上以490nm的吸光度读板。

小鼠[2]使用雌性小鼠（6周龄，BALB / c）。通过1cm纵向皮肤切口对所有24只小鼠进行卵巢切除，然后每周一次用戊酸雌二醇（0.5μg/小鼠/周）皮下注射6周，直至实验性子宫内膜异位症诱导。卵巢切除术后两周，在安乐死后整体取出另外八只供体小鼠（n = 8）的子宫，并在无菌盐水中清除多余的组织。每个子宫被切割成在每一半中包括子宫角，纵向和切碎（直径0.5mm）的线性切口用解剖剪刀。使用戊巴比妥钠麻醉切除卵巢的受体小鼠（n = 16）。制作0.5cm腹下中线切口。每个受体接受一半供体子宫（1：2供体子宫与宿主比例）切碎并加入500μl盐水中，并注入腹膜腔，并缝合腹膜。注射的子宫组织每只小鼠重约50mg。在接下来的4周内，每周两次腹膜内注射BV6（n = 8; 10mg / kg）或载体（n = 8; 1％DMSO）治疗受体小鼠。

[1]. Li W, et al. BV6, an IAP antagonist, activates apoptosis and enhances radiosensitization of non-small cell lung carcinoma in vitro. J Thorac Oncol. 2011 Nov;6(11):1801-9.

[2]. Uegaki T, et al. Inhibitor of apoptosis proteins (IAPs) may be effective therapeutic targets for treating endometriosis. Hum Reprod. 2015 Jan;30(1):149-58.

LCL161 | 比瑞那帕 | AZD5582 | SM-164 | GDC-0152 | 恩贝灵； 恩贝酸 | CUDC-427 | AT-406 | ASTX660 | MX-69 | UC-112