[ 描述 ]:
Ruxolitinib sulfate 是一种有效的 JAK1/2 抑制剂,IC50 值为 3.3 nM/2.8 nM,选择性是对 JAK3 的 130 倍。
[ 相关类别 ]:
[ 靶点 ]
JAK2:2.8 nM (IC50)
JAK1:3.3 nM (IC50)
Tyk2:19 nM (IC50)
JAK3:428 nM (IC50)
[体外研究]
Ruxolitinib硫酸盐是第一种有效的选择性JAK1/2抑制剂进入临床,IC50为3.3 nM/2.8 nM,对JAK1/2的选择性比JAK3高130倍。 Ruxolitinib有效且选择性地抑制JAK2V617F介导的信号传导和增殖,以剂量依赖性方式显着增加细胞凋亡,并且在64nM时导致Ba/F3细胞中去极化线粒体的细胞加倍。 Ruxolitinib对红细胞集落形成具有显着的效力,IC50为67 nM,并且抑制正常供体和真性红细胞增多症患者的红系祖细胞增殖,IC50值分别为407 nM和223 nM [1]。
[体内研究]
Ruxolitinib(180 mg/kg,口服,每日两次)导致第22天存活率大于90%,显着降低脾肿大和炎性细胞因子的循环水平,优先消除肿瘤细胞,导致生存期显着延长,无骨髓抑制或JAK2V617F驱动的小鼠模型中的免疫抑制作用[1]。在Ruxolitinib组中,41.9%的患者达到主要终点,而在骨髓纤维化双盲试验中安慰剂组为0.7%。 Ruxolitinib导致维持脾脏体积减少,总症状评分改善50%或更多[2]。 Ruxolitinib(15 mg每日两次)治疗使得总共28%的患者在骨髓纤维化患者的第48周脾脏体积减少至少35%,而接受最佳治疗的患者为0%。使用Ruxolitinib时,平均可触及的脾脏长度减少了56%,但是在第48周时使用最佳治疗方法增加了4%。在ruxolitinib组患者的整体生活质量指标改善并且症状减轻骨髓纤维化[3]。
[激酶实验]
使用Sf21细胞和杆状病毒载体表达重组蛋白,并用亲和层析纯化。 JAK激酶测定使用与肽底物(-EQEDEPEGDYFEWLE)的均相时间分辨荧光测定。每种酶反应用Ruxolitinib或对照,JAK酶,500nM肽,三磷酸腺苷(ATP; 1mM)和2%二甲基亚砜(DMSO)进行1小时。 50%抑制浓度(IC50)计算为抑制50%荧光信号所需的Ruxolitinib浓度[1]。
[细胞实验]
将细胞以2×103 /孔的白底96孔板接种,用来自DMSO原液的Ruxolitinib处理(0.2%最终DMSO浓度),并在37℃下用5%CO 2温育48小时。通过使用Cell-Titer Glo荧光素酶试剂或活细胞计数的细胞ATP测定来测量活力。将值转化为相对于载体对照的抑制百分比,并使用PRISM GraphPad [1]根据数据的非线性回归分析拟合IC 50曲线。
[动物实验]
小鼠[1]给小鼠喂食标准啮齿动物食物并随意提供水。将Ba / F3-JAK2V617F细胞(每只小鼠105只)静脉内接种到6至8周龄雌性BALB / c小鼠中。每天监测存活率,并且死亡的垂死的老鼠被人道地杀死并且被认为已经死亡。用载体(5%二甲基乙酰胺,0.5%甲基纤维素)或Ruxolitinib处理在细胞接种后24小时内开始,每天两次通过口服强饲法。使用分析的Bayer Advia120测量血液学参数,并使用Dunnett测试[1]确定统计学显着性。
[参考文献]
[1]. Quintas-Cardama A, et al. Preclinical characterization of the selective JAK1/2 inhibitor INCB018424: therapeutic implications for the treatment of myeloproliferative neoplasms. Blood, 2010, 115(15), 3109-3117.
[2]. Verstovsek S, et al. A double-blind, placebo-controlled trial of ruxolitinib for myelofibrosis. N Engl J Med, 2012, 366(9), 799-807.
[3]. Harrison C, et al. JAK inhibition with ruxolitinib versus best available therapy for myelofibrosis. N Engl J Med. 2012 Mar 1;366(9):787-98.
[相关活性小分子]
巴瑞克替尼
|
乌帕替尼
|
帕西替尼(SB1518)
|
Momelotinib
|
5-氯-N2-[(1S)-1-(5-氟-2-嘧啶基)乙基]-N4-(5-甲基-1H-吡唑-3-基)-2,4-嘧啶二胺
|
TG-101348
|
(2E)-3-(6-溴-2-吡啶基)-2-氰基-N-[(1S)-1-苯基乙基]-2-丙烯酰胺
|
CHZ868
|
1-环丙基-3-(3-(5-(吗啉甲基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)-1H-吡唑-4-基)脲
|
N-[5-[4-[(1,1-二氧代-4-硫代吗啉基)甲基]苯基][1,2,4]三唑并[1,5-A]吡啶-2-基]环丙烷甲酰胺
|
伊他替尼
|
赛度替尼
|
盐酸巴多昔芬
|
14-甲基-20-氧杂-5,7,14,27-四氮杂四环[19.3.1.1(2,6).1(8,12)]二十七碳-1(25),2,4,6(27),8,10,12(26),16,21,23-十烯
|
吡西替尼