4-[1,1'-联苯]-4-基-1,4,5,6,7,8-六氢-2,7,7-三甲基-5-氧代-3-喹啉羧酸乙酯

ITD-1 是第一个选择性的 TGFβ 抑制剂,IC50 为 460 nM。

信号通路 >> TGF-beta/Smad 信号通路 >> TGF-β受体

研究领域 >> 心血管疾病

IC50: 460 nM (TGFβ)

ITD-1有效阻断由TGFβ2诱导的效应SMAD2/3蛋白的磷酸化,并且仅对响应激活素A的反应最低。用Smad4反应元件转染HEK293T细胞驱动荧光素酶(SBE4-Luc)以测试ITD-1是否阻断激活素A/Nodal和/或TGFβ信号传导,其利用通过Smad4的相同细胞内信号级联。 ITD-1以相似的功效强烈抑制TGFβ2信号传导(分别为92％和99％),但与SB-431542(一种ACVR1B/TGFBR1激酶抑制剂)相比具有较低的效力(IC50 = 850nM,相对于70nM),并且是弱的和激活素A信号的部分抑制剂。 ITD-1选择性地增强未定型中胚层向心肌细胞的分化,但不增强血管平滑肌和内皮细胞的分化。 ITD-1揭示了TGFβ信号传导在控制多能心血管前体心肌细胞分化中的意外作用。

对于Smad4-反应元件（SBE4）测定，293T细胞在补充有1％FBS的无苯酚DMEM-高葡萄糖中生长。使用Lipofectamine 2000将约30000个细胞/ cm2逆转染到具有10ng SBE4-Lux和CMV-Renilla-Lux的白色384孔细胞培养板上。使细胞粘附至少12小时并用TGFβ2诱导（15 ng / mL），激活素A（15 ng / mL）。同时，将ITD-1（0.001,0.01,0.1,1和10μM）加入细胞中。 SB-431542用作激活素A /TGFβ-信号传导抑制的阳性对照。为了确定发光水平，使用Dual-Glo试剂盒并在Envision读板器上测量。萤火虫发光针对海肾荧光素酶标准化。

[1]. Willems E, et al. Small molecule-mediated TGF-β type II receptor degradation promotes cardiomyogenesis in embryonic stem cells. Cell Stem Cell. 2012 Aug 3;11(2):242-52.

SB431542 | Galunisertib (LY2157299) | 3-(6-甲基-2-吡啶基)-N-苯基-4-(4-喹啉基)-1H-吡唑-1-硫代甲酰胺 | 4-[5,6-二氢-2-(2-吡啶)-4H-吡咯并[1,2-b]吡唑-3-基]-7-[2-(4-吗啉)乙氧基]喹啉 | LDN193189 | 2-(3-(6-甲基吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-基)-1,5-萘啶 | SB525334 | EW-7197 | 4-[6-[4-异丙氧基苯基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基]喹啉 | 4-[4-[3-(吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-基]吡啶-2-基]-N-(四氢吡喃-4-基)苯甲酰胺 | LY-364947 | SB-505124 | LY3200882 | LSKL, 血小板反应蛋白抑制剂 (TSP-1) | K02288