去氢钩藤碱

Corynoxeine, 从 Uncaria rhynchophylla 的钩中分离的,是 PDGF-BB 诱导血管平滑肌细胞 (VSMCs) 增殖过程中的一种有效 ERK1/ERK 2 抑制剂。

天然产物 >> 生物碱

研究领域 >> 心血管疾病

ERK1

ERK2

Corynoxeine能够通过下调PDGF-BB诱导的ERK1/2激活来抑制PDGF-BB刺激的VSMC增殖。用Corynoxeine预孵育VSMC显着抑制PDGF-BB诱导的细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)激活,而Corynoxeine对丝裂原活化蛋白激酶(MAPK/ERK)激活激酶1和2(MEK1/2),Akt或磷脂酶C(PLC)γ1活化或PDGF受体β(PDGF-Rβ)磷酸化。在抑制VSMC增殖和DNA合成的相同浓度范围内,Corynoxeine抑制PDGF-BB诱导的ERK1/2活化。 Corynoxeine响应PDGF-BB抑制VSMC数量,50％抑制浓度(IC50)为13.7μM。 Corynoxeine响应PDGF-BB(24小时)抑制DNA合成,IC50为9.2μM。用Corynoxeine(5-50μM)预处理VSMC 24小时导致细胞数量显着减少而没有任何细胞毒性;在5,20和50μM时,抑制百分比分别为25.0±12.5,63.0±27.5和88.0±12.5％。 Corynoxeine还以浓度依赖性方式显着抑制50ng/mL PDGF-BB诱导的VSMCs DNA合成,没有任何细胞毒性;在浓度分别为5,20和50μM时,抑制率分别为32.8±11.0,51.8±8.0和76.9±7.4％[1]。

测量细胞增殖和DNA合成。对于细胞计数，将VSMC以5-6×10 4个细胞/ mL接种在12孔培养板中，并在含有10％FBS的DMEM中于37℃培养24小时。在这些条件下，细胞达到70％汇合。然后用含有Corynoxeine（5-50μM）的无血清培养基替换培养基。用50ng / mL PDGF-BB刺激细胞，然后用胰蛋白酶-EDTA进行胰蛋白酶消化，并在显微镜下使用血细胞计数器计数。对于[3H] - 胸苷掺入实验，将VSMC以24细胞/孔接种于24孔培养板中，然后在DMEM中培养3-4天，并向细胞中加入2μCi/ mL [3H] - 胸苷。介质。 4小时后，通过抽吸培养基并使培养物在含有10％三氯乙酸和乙醇/乙醚（1：1，v / v）的PBS上连续洗涤，终止反应。将不溶于酸的[3H] - 胸苷萃取到250μL的0.5M NaOH /孔中;然后将该溶液与3ml闪烁混合物混合并使用液体闪烁计数器[1]定量。

[1]. Kim TJ, et al. Corynoxeine isolated from the hook of Uncaria rhynchophylla inhibits rat aortic vascular smooth muscle cell proliferation through the blocking of extracellular signal regulated kinase 1/2 phosphorylation. Biol Pharm Bull. 2008 Nov;31(11):2073-8.

SCH772984 | ERK抑制剂 | 和厚朴酚 | 牛磺熊去氧胆酸钠 | LY3214996 | 优立替尼 | TIC10 | 黄芪甲苷IV | 2-[[2-乙氧基-4-(4-羟基-1-哌啶基)苯基]氨基]-5,11-二氢-5,11-二甲基-6H-嘧啶并[4,5-B][1,4]苯并二氮杂卓-6-酮 | LM22B-10 | VX11e | 5-(2-苯基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-基)-1H-吡唑并[3,4-c]哒嗪-3-胺 | 葫芦素,罗汉果醇 | Pluripotin | AX-15836