Δ4-Abiraterone

D4-abiraterone 是阿比特龙的主要代谢产物。D4-abiraterone 是 CYP17A1, 3β-羟基类固醇脱氢酶 (3 βHSD) 和类固醇-5α-还原酶 ( SRD5A ) 的抑制剂,也是雄激素受体的拮抗剂。

信号通路 >> 其他 >> 雄激素受体

信号通路 >> 代谢酶/蛋白酶 >> 细胞色素P450

研究领域 >> 癌症

CYP17A1, 3βHSD, SRD5A, androgen receptor[1]

D4-阿比特龙(D4A)(10mM)几乎完全阻断从D4-雄烯二酮(AD)到5α-雄甾烷二酮和其他5α-还原的雄激素的转化。 D4-阿比特龙对突变体(在LNCaP中表达,半最大抑制浓度(IC50 = 5.3nM))和野生型(在LAPC4中表达,IC50 = 7.9nM)雄激素受体(AR)的亲和力大于阿比特龙( Abi)(分别为IC 50 = 418和> 500nM)。与Abi相比,D4-阿比特龙明显更好地抑制LNCAP,LAPC4和C4-2细胞系中的PSA,TMPRSS2和FKBP5表达。 D4-阿比特龙还以剂量依赖性方式抑制AR靶基因表达[1]。

D4-阿比特龙(D4A)比阿比特龙(Abi)在LNCaP和VCaP异种移植物中通过3β-羟基类固醇脱氢酶(3βHSD)转化为D4-雄烯二酮(AD)的脱氢表雄酮(DHEA)的转化效力高10倍。 0.1μMD4-阿比特龙相当于1μMAbi,用于在LNCaP和VCaP异种移植物中48小时阻断AD积聚。与Abi乙酸酯组相比,D4-阿比特龙组的进展显着延迟(P = 0.011)。与阿比醋酸盐相比,D4-阿比特龙治疗可提高无进展生存期[1]。

为了测试D4-阿比特龙（D4A）作为3βHSD的抑制剂，进行酶测定。简而言之，用重组人3βHSD1或3βHSD2（在酵母微粒体中，每次孵育45或2.5μg蛋白质），D4-阿比特龙（5至20μM）或乙醇载体在0.5mL磷酸钾缓冲液（pH 7.4）中制备温育。 。在37℃预孵育1至3分钟后，加入NAD +（1mM），并在37℃下孵育20分钟。加入1mL乙酸乙酯：异辛烷（1：1）终止反应，然后将类固醇萃取到有机相中并干燥。干燥提取物中的类固醇通过HPLC分离，并通过在线闪烁计数进行定量[1]。

将细胞在无血清培养基中培养48小时，然后用指定浓度的D4-阿比特龙（D4A）处理30分钟。细胞用1×PBS洗涤4次，用0.9％NaCl溶液洗涤两次，然后用RIPA缓冲液裂解。用液体闪烁计数器测量细胞内放射性，并用Multilabel计数器检测标准化至蛋白质浓度[1]。

在该研究中使用6至8周龄的雄性NSG小鼠。通过手术睾丸切除小鼠并植入5mg 90天缓释脱氢表雄酮（DHEA）沉淀物以在人肾上腺生理学的背景下模拟去势抗性前列腺癌（CRPC）。两天后，107个VCaP或C4-2细胞皮下注射基质胶。一旦肿瘤达到300mm3，小鼠被任意（但不是严格随机）分配给载体（分别为VCaP和C4-2的n = 9或10只小鼠），D4-阿比特龙（D4A）（两种细胞系n = 10只小鼠）治疗组。每天通过5mL / kg腹膜内注射施用D4-阿比特龙（0.5mmol / kg /天，在0.1mL 5％苄醇和95％红花油溶液中），持续长达15天。对照组每天通过腹膜内注射给予0.1mL 5％苯甲醇和95％红花油溶液。每天测量肿瘤体积，并确定肿瘤体积增加20％的时间。小鼠在治疗第15天或当肿瘤大小比基线大2倍时被杀死[1]。

[1]. Li Z, et al. Conversion of abiraterone to D4A drives anti-tumour activity in prostate cancer. Nature. 2015 Jul 16;523(7560):347-51.

n-[4-[2-乙基-1-(1H-1,2,4-噻唑-1-基)丁基]苯基]-2-苯并噻唑胺 | 阿帕他胺 | 去氢表雄酮 | 芹菜素; 芹黄素; 5,7,4'-三羟基黄酮 | 可比司他 | 氟他胺 | Darolutamide (ODM-201) | 人参皂苷CK | 吉非罗齐 | 艾沙康唑 | 达那唑 | 柚皮苷 | 6-[(7S)-7-羟基-6,7-二氢-5H-吡咯并[1,2-C]咪唑-7-基]-N-甲基-2-萘甲酰胺 | 普罗地芬 盐酸盐 | 3,3'-亚甲基二吲哚